明党参

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TUhjnbcbe - 2021/7/9 3:48:00
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火山今始见,突兀蒲昌东。——岑参《经火山》

大家好,我是阿琛。当我们通过分析得到基因在不同分组中的表达情况,以及显著上调或下调的差异基因时,如何将该结果进行可视化展示随之出现。在生信分析中,火山图和热图是两种最为常见的展示方法。火山图,VolcanoPlot,因其形状类似喷发的火山而得名。

1.R包得安装与读取

首先,自然是R包的选择与安装。经过多期内容的讲解,相信大家对于R语言绘图也基本有了一个基本的了解。作图常用三大包,分别是base包,强大的ggplot2包,以及在ggplot2基础上发展而来的ggpubr包。对于点图的绘制,在此我们选择ggpubr包来讲讲火山图的绘制。

#install.packages("ggpubr")#install.packages("ggthemes")#加载ggpubr包library(ggpubr)library(ggthemes)

2.数据集得加载与引用

rt-read.table("TCGA.diff.txt",sep="",header=T)head(rt)#显示前6行结果显示,在该数据集中,包括了基因名,正常组和对照组的表达平均值,以及差异分析得到的logFC,P值,以及校正后的fdr值。

str(rt)#查看数据结构通过str()函数简单查看每个变量的数据类型。

3.数据内容的整理

#对fdr值进行取对数处理rtlogP--log10(rtfdr)#定义显著上/下调基因rtType-"no"#新增一列TypertType[which((rtfdr0.05)(rtlogFC1))]-"up-regulated"rtType[which((rtfdr0.05)(rtlogFC-1))]-"down-regulated"table(rtType)#对Type中的数量进行统计到此,整个数据的准备工作就基本完成了,其中显著上调的基因共23个,显著下调的基因共个。

4.绘制火山图

接下来,我们一起来看下如何一步步由浅入深,逐步绘制火山图逐步为火山图添砖加瓦,增加各种信息。

ggscatter(rt,x="logFC",y="logP")+theme_base()+ylim(-0.2,17)首先,在ggscatter()函数中对数据集和图形的x轴、y轴进行定义,得到整个火山图的初步框架。

ggscatter(rt,x="logFC",y="logP",color="Type",palette=c("blue","black","red"),size=1)+theme_base()+ylim(-0.2,17)随后,对基因中显著上调或者下调的基因颜色进行定义,赋予上调的基因红色,以及下调的基因蓝色,进行可视化的区分。

ggscatter(rt,x="logFC",y="logP",color="Type",palette=c("blue","black","red"),size=1)+theme_base()+ylim(-0.2,17)+geom_hline(yintercept=-log10(0.05),linetype="dashed")+geom_vline(xintercept=c(-1,1),linetype="dashed")通过geomhline()和geomvline()两个函数,分别在x轴和y轴方向上添加三条辅助性的虚线,将显著改变的基因与其他基因进行区分开来。到此为止,火山图也就基本绘制完成了。当然,有些小伙伴可能还在文章中见过带基因名字标签的高级版火山图。接下来,我们就来看下如何对显著上调或下调的5个点添加基因标签。

rtName=""#新加一列Namert-rt[order(rtfdr),]#对差异基因的p值进行从小到大的排序#高表达的基因中,选择fdr值最小的5个up.genes-head(rtgene[which(rtType=="up-regulated")],5)#低表达的基因中,选择fdr值最小的5个down.genes-head(rtgene[which(rtType=="down-regulated")],5)#将up.genes和down.genes合并,并加入到Name中rt.top.genes-c(as.character(up.genes),as.character(down.genes))rtName[match(rt.top.genes,rtgene)]-rt.top.genes新增一个名为Name的列,通过排序,分别筛选出fdr值最小的显著上调和下调基因,并将他们的基因名赋予给Name列。

#绘制火山图ggscatter(rt,x="logFC",y="logP",color="Type",palette=c("blue","black","red"),size=1,label=rtLabel,font.label=8,repel=T,xlab="log2FoldChange",ylab="-log10(AdjustP-value)")+theme_base()+ylim(-0.2,17)+geom_hline(yintercept=-log10(0.05),linetype="dashed")+geom_vline(xintercept=c(-1,1),linetype="dashed")这样,一张精美的高级版火山图就绘制完成了。差异分析搭配火山图来展示,是不是十分完美呢?好了,今天的分享就到此为止了,大家根据讲解自己进行相关的练习~~~

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